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饲料中维生素D3的测定

饲料中维生素D3的测定

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1  仪器及试剂

仪 器:

1). 分析天平一台(精度0.1mg);

2). 恒温水浴锅一台;

3). 容量瓶;

4). 微量进样器(5ul或10?l)一支;

5). 微量可调移液枪(1000ul)一支、吸头多个

6). 旋涡混匀器一台;

7). LC-10Tvp高效液相色谱仪;

试 剂:

1). 超纯水(18MΩ?cm);

2). 甲醇,色谱纯;

3). 维生素D3标准品:含量≥99%;

4). 维生素D3标准贮备液;

5). 维生素D3标准工作液;

2  样品制备

称取饲料样品1g,精确至0.0001g,置于100ml的棕色容量瓶中,加入约80ml的甲醇,瓶塞不要拧紧,于65℃超声波水浴中超声提取30min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。则将溶液过0.45?m滤膜过滤,进样测定。使维生素D3的进样浓度与标准工作液浓度接近。

3  色谱条件

色谱柱:Vertex C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm;

流动相:甲醇+水(98+2);

流速:1.0mlmin;

温度:室温;

进样量:20μl

检测波长:264nm。

4  色谱图

饲料维生素D3.jpg

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